質粒小量提取試劑盒I型，Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column說明書

上海遠慕生物代理不同系列的進口品牌試劑，美國Omega代理商，包含有：M-13單鏈DNA提取試劑盒，磁珠質粒超大量提取試劑盒，瓊脂糖凝膠回收試劑盒，超薄柱型PCR產物純化試劑盒，96孔過濾板，一次性多道移液槍分裝容器，1.2ml帶蓋固定圓底收集板。其他Omega系列，了解更多進口試劑，請！

名稱：質粒小量提取試劑盒I型

品牌：Omega

供應商：上海遠慕

型號：Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column

用途：從小于5ml培養(yǎng)過夜的細菌培養(yǎng)液中純化約35ug質粒DNA

Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column特性:
簡單-硅膠柱過濾操作
快速-在30分鐘內完成多個樣品的抽提工作
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美國Omega生物技術公司是一家專門從事核酸分離純化試劑盒研發(fā)與生產的企業(yè)，是一家zui早以硅膠膜純化為基礎的核酸純化公司之一，經(jīng)過長期的不斷奮斗和創(chuàng)新，Omega公司在此基礎上已經(jīng)發(fā)展出上百種的核酸純化試劑盒，包括了質粒提取、DNA/RNA純化、基因組DNA提取、RNA提取、mRNA純化。特別是在基因組DNA和RNA提取這兩個系統(tǒng)中，Omega根據(jù)不同材料的特殊性，發(fā)展出了一系列針對性相當強的試劑盒，如真菌，植物，昆蟲，軟體動物，土壤，糞便等樣品的DNA/RNA提取試劑盒，因而大大的方便了廣大的科研工作者。

Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column提取步驟：

 
1. 樣本處理收集已培養(yǎng)1216小時的菌液13ml12000rpm離心1分鐘，盡量吸除上清。          注：菌液較多時可以通過多次重復離心將菌體收集到1個離心管中。菌液收集量由菌濃而定收集菌體過多會反而降低裂解效果。 

2. 懸浮向菌體沉淀的離心管中加入250ul溶液Ⅰ用移液器反復吹打或渦旋振蕩器*懸浮細菌細胞沉淀。 

3. 裂解加入250ul溶液Ⅱ于細菌懸液中溫和地上下顛倒6~8次，使菌體充分裂解加1管混合1管確保溶液充分、及時的混勻。充分裂解后的菌液會變得相對粘稠為防止DNA斷裂避免劇烈混勻操作及裂解時間過長。 

4. 中和加入350ul溶液Ⅲ, 立即溫和上下顛倒6~8次充分混勻，加1管混合1管。此時會出現(xiàn)白色絮狀沉淀靜置2分鐘12000rpm離心5分鐘，可適當延長至10min。 
注：溶液Ⅲ加入后應立即混勻避免產生局部沉淀。若上清液中仍存在微小白色沉淀，可重復離心后取上清。 

5. 吸附小心地將上清液轉移至吸附柱中12000rpm離心30~60秒，棄收集管中廢液，然后將吸附柱重新套入廢液收集管中。若上清一次加不完，可重復操作轉移時不可吸入沉淀此步很重要。

6. 漂洗向吸附柱中加入600ul漂洗液PW使用前請檢查是否已加入無水乙醇，12000rpm離30~60秒。 

7. 重復步驟6棄收集管中廢液。

 
8. 將吸附柱套于收集管中，10000rpm離心2分鐘。

注:此步驟不可省略目的是去除吸附柱中殘余的漂洗液因為漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)實驗,酶切PCR等。

9. 洗脫將吸附柱置于一干凈的1.5ml離心管中向吸附柱膜中央部位懸空滴加50~100ul溶解液TE或滅菌雙蒸水，pH值在7.0-8.5，室溫靜置2~10分鐘，12000rpm離心2分鐘，即得提取質粒DNA于-20℃保存。

標簽：質粒小量提取試劑盒I型  Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column   質粒小量提取試劑盒