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生物學(xué)X射線輻照儀在DNA損傷的應(yīng)用
點(diǎn)擊次數(shù):1066 更新時(shí)間:2019-04-01

    生物學(xué) X 射線輻照近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種放療方法,具有安全性高、使用方便、可在普通實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下使用等優(yōu)點(diǎn),在科研領(lǐng)域上,常用于取代傳統(tǒng)的γ源輻照。

    美國(guó) Cellrad 生物學(xué) X 射線輻照儀具備 130KV 的 X 射線能量,可對(duì)細(xì)胞或小動(dòng)物進(jìn)行照射,從而用于干細(xì)胞 (骨髓移植及分化,飼養(yǎng)層細(xì)胞制備、細(xì)胞誘變等)、DNA 損傷、Cell cycle、細(xì)胞培養(yǎng)、血制品照射、腫瘤、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫、基因治療、放射生物學(xué)、藥物研發(fā)等生物技術(shù)研究。

    DNA 存儲(chǔ)著生物體賴以生存和繁衍的遺傳信息,因此維護(hù) DNA 分子的完整性對(duì)細(xì)胞至關(guān)緊要。外界環(huán)境和生物體內(nèi)部的因素都經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致 DNA 分子的損傷或改變,而且與 RNA 及蛋白質(zhì)可以在細(xì)胞內(nèi)大量合成不同,一般在一個(gè)原核細(xì)胞中只有一份 DNA,在真核二倍體細(xì)胞中相同的 DNA 也只有一對(duì),如果 DNA 的損傷或遺傳信息的改變不能更正,對(duì)體細(xì)胞就可能影響其功能或生存,對(duì)生zhi細(xì)胞則可能影響到后代。 所以在進(jìn)化過程中生物細(xì)胞所獲得的修復(fù) DNA 損傷的能力就顯得十分重要,也是生物能保持遺傳穩(wěn)定性之所在。

電離輻射引起的 DNA 損傷

   電離輻射損傷 DNA 有直接和間接的效應(yīng),直接效應(yīng)是 DNA 直接吸收射線能量而遭損傷,間接效應(yīng)是指 DNA 周圍其他分子(主要是水分子)吸收射線能量產(chǎn)生具有很高反應(yīng)活性的自由基進(jìn)而損傷 DNA。電離輻射可導(dǎo)致 DNA 分子的多種變化:

     如:HPV 陽(yáng)性頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中 DNA 損傷修復(fù)途徑的錯(cuò)誤調(diào)節(jié)有助于細(xì)胞放射敏感性
 



(B)在用增加劑量的X射線照射(0-4Gy)處理后分析OPSCC細(xì)胞的克隆形成存活。顯示的是存活的部分,其具有來(lái)自至少三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)誤差。通過單因素方差分析比較2 Gy(SF2)的存活分?jǐn)?shù),結(jié)果顯示p<0.01(UMSCC6與UMSCC47),p <0.005(UMSCC6與UPCI-SCC090),p <0.02(UMSCC74A與UMSCC47),p <0.002 (UMSCC74A與UPCI-SCC090)。


 

   圖 2:HPV 陰性和 HPV 陽(yáng)性 OPSCC 細(xì)胞中 DNA DSB 修復(fù)的比較效率。

(A)照射細(xì)胞(4Gy)并通過中性單細(xì)胞凝膠電泳測(cè)定在 IR 后的不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)量 DNA DSB。 顯示%尾 DNA,其具有與至少三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)偏差,標(biāo)準(zhǔn)化為 IR 后(0 分鐘)立即觀察到的水平,其設(shè)定為 100%。 * p<0.05,** p <0.01,*** p <0.005,通過在每個(gè)特定時(shí)間點(diǎn)相對(duì)于 UMSCC6 細(xì)胞的各細(xì)胞中歸一化的%尾 DNA 值的一個(gè)樣品 t-檢驗(yàn)進(jìn)行分析。

(B)通過中性彗星試驗(yàn)可視化的 OPSCC 細(xì)胞的代表性圖像,證明 HPV 陽(yáng)性對(duì) HPV 陰性 OPSCC 細(xì)胞中 DNA DSB 的缺陷修復(fù)。

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