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電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液的配置
點(diǎn)擊次數(shù):151 更新時(shí)間:2025-03-25

電泳緩沖液

50×Tris-乙酸(TAE)緩沖液
成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量
2mol/L Tris堿
1mol/L乙酸
100 mmol/L EDTA
水242g
57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)
200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
補(bǔ)足1L

5×Tris-硼/酸(TBE)緩沖液
成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris堿
445 mmol/L硼/酸鹽
10 mmol/L EDTA
水54g
27.5g硼/酸
20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
補(bǔ)足1L

染料

1%溴酚藍(lán)(bromophenol blue)
加1g水溶性鈉型溴酚藍(lán)于100ml水中,攪拌或渦旋混合直到完w全溶解。

1%二甲/苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲/苯青FF于足量水中,定容到100ml。

10mg/ml的溴化乙錠(ethidium bromide)
小心稱取1g溴化乙錠,轉(zhuǎn)移到廣口瓶中,加100ml水,用磁力攪拌器攪拌直到完w全溶解。用鋁箔包裹裝液管,于4℃貯存。

凝膠上樣液(gel loading solutions)

6×堿性凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.3 N氫氧/化鈉
6 mmol/L EDTA
18%聚蔗糖(400型)
0.15%溴甲/酚綠
0.25%二甲/苯青FF
水300ul 10N氫氧/化鈉
120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.8g
15mg
25mg
補(bǔ)足到10ml

6×聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍(lán)
0.15%二甲/苯青FF
5 mmol/L EDTA
15%聚蔗糖(400型)
水1.5ml 1%溴酚藍(lán)
1.5ml 1%二甲/苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.5g
補(bǔ)足到10ml

6×溴酚藍(lán)/二甲/苯青/聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚藍(lán)
0.25%二甲/苯青FF
15%聚蔗糖(400型)
水2.5ml 1%溴酚藍(lán)
2.5ml 1%二甲/苯青FF
1.5g
補(bǔ)足到10ml

6×甘油凝膠上樣液(4℃貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍(lán)
0.15%二甲/苯青FF
5 mmol/L EDTA
50%甘油
水1.5ml 1%溴酚藍(lán)
1.5ml 1%二甲/苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
3ml
3.9ml

6×蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍(lán)
0.15%二甲/苯青FF
5 mmol/L EDTA
40%聚蔗糖
水1.5ml 1%溴酚藍(lán)
1.5ml 1%二甲/苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
4g
補(bǔ)足到10ml

10×十二烷基硫酸鈉/甘油凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚藍(lán)
0.2%二甲/苯青FF
200 mmol/L EDTA
0.1%SDS
50%甘油
水20mg
20mg
4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
100ul 10%SDS
5ml
補(bǔ)足到10ml

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